Características y preparación del Buffer TBE (Tris, Borato, EDTA) y TAE (Tris, Ácido Acético, EDTA)

Hay dos soluciones tampón muy usadas para separación de fragmentos de ADN mediante electroforesis, son el buffer TBE y buffer TAE, que sólo se diferencian en un compuesto, ácido bórico y ácido acético respectivamente.

Componentes:

– Tris (Tris-(hidroximetil)-aminometano): Molécula responsable del tamponamiento. Regulación del pH.

– Ácido Bórico/Ácido Acético : contribuye a ajustar el pH deseado e igual que el anterior, a mantenerlo.

– EDTA (Ácido Etilendiaminotetraacético): quelante de cationes divalentes, cuya función es secuestrar Mg2+, con lo que se evita que las posibles nucleasas presentes degraden el ADN de la muestra, ya que la mayoría de las nucleasas requieren de Mg2+ como cofactor.

Diferencias entre el buffer TBE y TAE:

– Migración: El TAE es mejor para el análisis electroforético de fragmentos grandes de ADN (900 – 2000bp) ya que corren más rápido y tiene mayor capacidad de discriminación en un gel de agarosa a 0.8%. Mientras que en TBE para fragmentos pequeños de ADN (100 – 500bp) corren más rápido y tiene mayor capacidad de discriminación en gel de agarosa al 2%.

– Capacidad tamponante: el TBE es más estable y tiene una capacidad tampón más alta que el TAE.

– Reciclaje: el TAE no aguanta más de 3 corridas de electroforesis seguidas sin alterar sus propiedades, mientras que el TBE dura 3 o 4 días independientemente de las corridas de electroforesis realizadas.

– Recuperación del ADN: el TBE tiene una interacción pegajosa con la agarosa, lo que provoca una recuperación baja del ADN.

Acerca de Antonio Gómez

Investigador y Docente FPDI de la UGR, Bioemprendedor 2.0 especializado en Genética y Toxicogenética, interesado en las Nuevas Tecnologías y las Redes Sociales
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15 respuestas a Características y preparación del Buffer TBE (Tris, Borato, EDTA) y TAE (Tris, Ácido Acético, EDTA)

  1. Waspy dijo:

    gracias por el post, está muy bueno

  2. Adán dijo:

    Buena información…

  3. wilson dijo:

    gracias me salvaste el informe! no sé donde más buscar esta info :O

  4. :) yayis dijo:

    genial gracias

  5. Alonso dijo:

    Muy útil, muchas gracias.

  6. karen fuentes dijo:

    hola buenas días profesor investigador será posible regalarme información para PCR de tripanosoma en bovinos? como se llevaría acabo ese proceso? le agradezco la información gracias🙂

  7. Cristian Hobán dijo:

    Gracias. Me sirvió de mucho tu explicación.

  8. Buenas Tardes, seria posible me nombres otros tipos buffers (tampones) de electroforesis y cuáles serian sus cualidades? creo que voy a enloquecer buscando informacíon, tu entrada me ah sido muy util !

  9. María Mercedes dijo:

    Muchísimas gracias por esta entrada, me fue de mucha ayuda.

  10. lucy vilca dijo:

    que otros buffer se pueden utilizar para la eletroforesis de RNA

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